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這篇研究探討了一種新的癌癥疫苗療法，該療法使用電穿孔技術(shù)將外源性卵白蛋白（OVA）蛋白加載到骨髓來源的樹突狀細(xì)胞（DCs）中，并同時(shí)用α-半乳糖神經(jīng)酰胺（α-GalCer）刺激。
這個(gè)策略通過激活不變型自然殺傷性T細(xì)胞（iNKT）、自然殺傷性細(xì)胞（NK）和固有的DCs，增強(qiáng)了針對(duì)腫瘤相關(guān)抗原的細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞的誘導(dǎo)。此外，該策略可以長(zhǎng)期維持抗原特異性抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)。研究結(jié)果表明，這種新型的DCs疫苗能夠有效地誘導(dǎo)抗原特異性抗腫瘤免疫力，并通過誘導(dǎo)組織駐留記憶T細(xì)胞（TRM）實(shí)現(xiàn)持久性的免疫保護(hù)。
01. 這項(xiàng)研究的主要目標(biāo)是什么？
本研究旨在開發(fā)一種新的癌癥疫苗策略，通過將外源卵清蛋白 (OVA) 電穿孔到骨髓來源的樹突狀細(xì)胞 (DCs) 中，并同時(shí)用 α-半乳糖神經(jīng)酰胺 (α-GalCer) 進(jìn)行脈沖，從而誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤抗原的細(xì)胞毒性 CD8+ T 細(xì)胞 (CTL)。
02. 為什么選擇樹突狀細(xì)胞作為遞送疫苗的載體？
樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)的抗原呈遞細(xì)胞 (APC) 群體。它們?cè)趩?dòng)和調(diào)節(jié)針對(duì)腫瘤抗原的免疫反應(yīng)方面起著至關(guān)重要的作用。先前研究表明，與游離α-GalCer給藥相比，用α-GalCer脈沖的CD1d表達(dá)DC（形成α-GalCer-CD1d復(fù)合物）的治療性給藥抑制了腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，并延長(zhǎng)了荷瘤宿主的存活時(shí)間。
03. OVA-EP-galDC 疫苗是如何制備的？
從小鼠骨髓中提取未成熟的樹突狀細(xì)胞 (imDCs)。然后用電穿孔將全長(zhǎng)卵清蛋白 (OVA) 加載到 imDCs 中，用 α-GalCer 進(jìn)行脈沖，并用脂多糖 (LPS) 刺激以誘導(dǎo)成熟。
04. OVA-EP-galDC 疫苗如何誘導(dǎo)抗腫瘤免疫？
OVA-EP-galDC 疫苗通過激活不變自然殺傷 T (iNKT) 細(xì)胞啟動(dòng)免疫級(jí)聯(lián)反應(yīng)。活化的 iNKT 細(xì)胞隨后激活自然殺傷 (NK) 細(xì)胞和內(nèi)源性 DC。這些活化的 DC 交叉呈遞 OVA 抗原，從而刺激 OVA 特異性 CD8+ T 細(xì)胞，包括組織駐留記憶 T (TRM) 細(xì)胞。
05. OVA-EP-galDC 疫苗在預(yù)防腫瘤方面有效嗎？
是的，OVA-EP-galDC 疫苗在預(yù)防性模型中顯示出顯著的抗腫瘤效果。接受 OVA-EP-galDC 疫苗接種的小鼠在隨后接受 OVA 表達(dá)腫瘤細(xì)胞 (EG7) 攻擊后，表現(xiàn)出腫瘤排斥。
06. CD8+ T 細(xì)胞在 OVA-EP-galDC 疫苗介導(dǎo)的抗腫瘤免疫中起什么作用？
CD8+ T 細(xì)胞對(duì)于 OVA-EP-galDC 疫苗的抗腫瘤作用至關(guān)重要。CD8+ T 細(xì)胞耗竭顯著降低了疫苗的療效，導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)增加。
07. OVA-EP-galDC 疫苗誘導(dǎo)記憶 T 細(xì)胞反應(yīng)嗎？
本研究結(jié)果表明，OVA-EP-galDC 疫苗是一種有前景的抗腫瘤免疫治療策略。它能夠誘導(dǎo)強(qiáng)大的、抗原特異性的 T 細(xì)胞反應(yīng)，包括 TRM 細(xì)胞的生成，從而導(dǎo)致腫瘤排斥。該疫苗平臺(tái)有可能針對(duì)各種癌癥進(jìn)行開發(fā)和個(gè)性化，為癌癥患者提供有效的治療選擇。
在文中，Maxcyte 電轉(zhuǎn)染技術(shù)被用于將完整的卵清蛋白 (OVA) 裝載到骨髓來源的未成熟樹突狀細(xì)胞 (imDCs) 中，用于制備 OVA-EP-galDC 疫苗。
(1) 高效裝載抗原：與傳統(tǒng)的共培養(yǎng)方法相比，Maxcyte 電轉(zhuǎn)染技術(shù)可以將更高濃度的 OVA 裝載到 imDCs 中，從而提高抗原呈遞效率。
(2) 維持細(xì)胞活力：盡管電轉(zhuǎn)染過程會(huì)對(duì)細(xì)胞造成一定損傷，但與高濃度 OVA 共培養(yǎng)相比，Maxcyte 電轉(zhuǎn)染技術(shù)處理后的 imDCs 活力更高。
通過 Maxcyte 電轉(zhuǎn)染技術(shù)，研究人員可以高效地將 OVA 抗原裝載到 DCs 中，并制備出高效的 OVA-EP-galDC 疫苗，為腫瘤免疫治療提供了一種新的策略。
(* 本文轉(zhuǎn)載自「拓普百奧」微信公眾號(hào)，已獲得授權(quán))
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